Чувствительность хорьков, кошек, собак и других домашних животных к торс-коронавирусу 2

Цитируется по изданию Science 08 апр 2020: EABB7015 ; DOI: 10.1126/science.abb7015 

Тяжелый острый респираторный синдром коронавирус 2 (SARS-CoV-2) вызывает инфекционное заболевание COVID-19, которое впервые было зарегистрировано в Ухане, Китай, в декабре 2019 года. Несмотря на огромные усилия по борьбе с этим заболеванием, КОВИД-19 в настоящее время распространился на более чем 100 стран и вызвал глобальную пандемию. Считается, что SARS-CoV-2 возник у летучих мышей; однако промежуточные животные источники вируса полностью неизвестны. Здесь мы исследовали восприимчивость хорьков и животных, находящихся в тесном контакте с человеком, к SARS-CoV-2. Мы обнаружили, что SARS-CoV-2 плохо размножается у собак, свиней, кур и уток, но хорьки и кошки допускают инфекцию. Мы экспериментально обнаружили, что кошки восприимчивы к воздушно-капельной инфекции. Наше исследование предоставляет важные сведения о моделях животных для SARS-CoV-2 и управления животными для контроля COVID-19.

В конце декабря 2019 года необычная пневмония появилась у людей в Ухане, Китай, и быстро распространилась на международном уровне, что вызвало глобальные проблемы общественного здравоохранения. Возбудитель был идентифицирован как новый коронавирус (1 – 16), который был назван тяжелым острым респираторным синдромом коронавирус 2 (SARS-CoV-2) на основе филогенетического анализа родственных коронавирусов исследовательской группой по Коронавирусам Международного Комитета по вирусной таксономии (17); заболевание, которое он вызывает, было впоследствии обозначено COVID-19 Всемирной организацией здравоохранения (ВОЗ). Несмотря на огромные усилия по борьбе со вспышкой COVID-19, болезнь все еще распространяется. По состоянию на 11 марта 2020 года, инфекции SARS-CoV-2 были зарегистрированы более чем в 100 странах, и 118 326 случаев заболевания были подтверждены, с 4292 смертельными исходами ( 18 ). В настоящее время ВОЗ объявила COVID-19 пандемией.

Хотя SARS-CoV-2 имеет 96,2% идентичность на уровне нуклеотидов с коронавирусом RaTG13, который был обнаружен у подковообразных летучих мышей (Rhinolophus spp) в провинции Юньнань в 2013 году ( 3), он ранее не был обнаружен у людей или других животных. Складывающаяся ситуация вызывает много неотложных вопросов. Могут ли широко распространенные вирусы передаваться другим видам животных, которые затем становятся резервуарами инфекции? Инфекция SARS-CoV-2 имеет широкий клинический спектр у людей, от легкой инфекции до смерти, но как вирус ведет себя у других животных? Поскольку предпринимаются усилия по разработке вакцин и противовирусных препаратов, какие животные могут быть наиболее точно использованы для моделирования эффективности таких мер контроля у человека? Для решения этих вопросов нами была проведена оценка чувствительности различных модельных лабораторных животных, а также компаньонных и домашних животных к ОРВИ-ков-2.

Все эксперименты с инфекцией SARS-CoV-2 проводились на объектах уровня 4 биобезопасности и уровня 4 биобезопасности животных в Харбинском ветеринарном Научно-исследовательском институте (HVRI) Китайской академии сельскохозяйственных наук (CAAS), который был одобрен для такого использования Министерством сельского хозяйства и сельских дел Китая. Подробная информация о принятых мерах по обеспечению биобезопасности и биозащищенности содержится в дополнительных материалах (19). Протоколы для изучения животных и благополучия животных были рассмотрены и одобрены комитетом по этике экспериментов на животных HVRI CAAS (номер утверждения 2020-01-01JiPi).

Хорьки обычно используются в качестве модели животного для респираторных вирусов, которые заражают людей ( 20-26). Поэтому мы проверили восприимчивость SARS-CoV-2 у хорьков. В настоящем исследовании использовались два вируса [SARS-CoV-2/F13/environment/2020/Wuhan, выделенные из экологической пробы, собранной на рынке морепродуктов Хуанань в Ухане (F13-E), и SARS-CoV-2/CTan/human/2020/Wuhan (CTan-H), выделенные от пациента-человека]. Пары хорьков были привиты интраназально с 10 ⁵ бляшка формируя блок (PFU) F13-E или CTan-H, соответственно, и усыпленный на день 4 пост-прививка (p.i.). Носовая турбина, мягкое небо, миндалины, трахея, легкие, сердце, печень, селезенка, почки, поджелудочная железа, тонкий кишечник и мозг от каждого хорька были собраны для количественного определения вирусной РНК методом qPCR и титрования вируса в клетках Vero E6. Вирусная РНК ( рис. 1, А и Б ) и инфекционный вирус был обнаружен в носовой полости, мягком небе и миндалинах всех четырех хорьков, привитых этими двумя вирусами, но не был обнаружен ни в одном из других тестируемых органов ( Рис.2). 1, C и D). Эти результаты указывают на то, что SARS-CoV-2 может размножаться в верхних дыхательных путях хорьков, но его репликация в других органах не обнаруживается.

Для изучения динамики репликации этих вирусов у хорьков группы из трех животных интраназально инокулировали 10 ⁵ ПФУ F13-E или CTan-H, а затем помещали в три отдельные клетки внутри изолятора. Носовые промывки и ректальные мазки собирали на 2, 4, 6, 8 и 10 сутки от хорьков для выявления вирусной РНК и титрования вируса. Температура тела и признаки заболевания отслеживались в течение двух недель. Как показано на фиг. 1, вирусная РНК была обнаружена в носовых смывах на 2-е, 4-е, 6-е и 8-е сутки у всех шести хорьков, привитых двумя вирусами ( Рис.2). 1, E и F). Вирусная РНК была также обнаружена в некоторых из ректальных мазков привитых вирусом хорьков, хотя число копий было заметно ниже, чем в носовых промывках этих хорьков (рис.2). S1, A и C). Инфекционный вирус был обнаружен из носовых смывов всех хорьков ( рис. 1, Г И З ), но не из ректальных мазков каких-либо хорьков (рис. S1, B и D).

У одного хорька из каждой привитой вирусами группы на 10-й и 12-й день жизни соответственно развилась лихорадка и потеря аппетита. Чтобы выяснить, были ли эти симптомы вызваны репликацией вируса в нижних дыхательных путях, мы усыпили двух хорьков на 13-й день жизни и собрали их органы для обнаружения вирусной РНК. Однако вирусная РНК не была обнаружена ни в каких других тканях или органах ни одного хорька, за исключением небольшого числа копий (10 ^5.4 копии/г) в турбинате хорька, привитого CTan-H (рис. S2). Патологоанатомические исследования выявили выраженный лимфоплазмоцитарный периваскулит и васкулит, повышенное количество пневмоцитов II типа, макрофагов и нейтрофилов в альвеолярных септах и просвете альвеол, а также легкий перибронхит в легких двух усыпленных хорьков на 13-е сутки жизни (рис.1). S3). Антитела против SARS-CoV-2 были обнаружены у всех хорьков методом ИФА и методом нейтрализации, хотя титры антител у двух хорьков, подвергшихся эвтаназии на 13-й день жизни, не отличались. были заметно ниже, чем у усыпленных хорьков на 20-й день жизни ( Рис.1). 1, I to L).

Анализ прикрепления вируса показал, что SARS-CoV-2 может прикрепляться к клеткам бронхиального эпителия (рис. S4A) и некоторые пневмоциты II типа (рис. S4B) в легком хорька. Чтобы дополнительно исследовать, размножается ли SARS-CoV-2 в легких хорьков, мы интратрахеально привили восемь хорьков с 10 ⁵ PFU из CTan-H и усыпил двух животных каждый на 2, 4, 8 и 14 p.i., чтобы искать вирусную РНК в тканях и органах. Вирусная РНК была обнаружена только в носовой раковине и мягком небе одного из двух хорьков, которые были усыплены на 2-й и 4-й день жизни; в мягком небе одного хорька и в носовой раковине, мягком небе, миндалине и трахее другого хорька, которые были усыплены на 8-й день жизни; и не была обнаружена ни в одном из двух хорьков, которые были усыплены на 14-й день жизни (рис. S5). Эти результаты указывают на то, что ОРВИ-ков-2 может размножаться в верхних дыхательных путях хорьков в течение до восьми дней, не вызывая тяжелых заболеваний или смерти.

Кошки и собаки находятся в тесном контакте с людьми, и поэтому важно понимать их восприимчивость к SARS-CoV-2 для контроля COVID-19. Мы впервые исследовали репликацию SARS-CoV-2 у кошек. Семь субадульных кошек (в возрасте 6-9 месяцев, беспородные домашние кошки) были интраназально привиты 10 ⁵ ПФУ из CTan-H. два животных были запланированы к эвтаназии на 3-й и 6-й дни соответственно, чтобы оценить вирусную репликацию в их органах. Три кошки субадульта были помещены в отдельные клетки внутри изолятора. Для контроля за передачей дыхательных капель неинфицированную кошку помещали в клетку, примыкающую к каждой из зараженных кошек. Было трудно проводить регулярный сбор носовых смывов на субадульных кошках, потому что они были агрессивными. Чтобы избежать возможных травм, мы собирали фекалии только у этих кошек и проверяли наличие вирусной РНК в их органах после эвтаназии.

Вирусная РНК была обнаружена в носовой мутации одного животного, в мягких небах, миндалинах, трахее, легких и тонком кишечнике обоих животных, которые были усыплены на 3-й день жизни ( Рис.1). 2А). У животных, которые были усыплены в день 6 часов.я., вирусная РНК была обнаружена в носовых раковин, мягкого неба и миндалин обоих животных, в трахее одного животного, и в тонком кишечнике; однако, РНК не обнаружены ни в одном из легких образцов ни в одном из этих животных (рис. 2C). Инфекционный вирус был обнаружен в вирусных РНК-положительных носовых раковинах, мягком небе, миндалинах, трахее, легких этих кошек, но не был выделен из вирусной РНК-положительной тонкой кишки ( Рис.2). 2, B и D)

При исследовании передачи вирусная РНК была обнаружена в фекалиях двух привитых вирусом субадульных кошек на 3-й день жизни, и во всех трех привитых вирусом субадульных кошках на 5-й день жизни ( Рис.1). 3А). Вирусная РНК была обнаружена в фекалиях одной экспонированной кошки на 3-е сутки жизни ( Рис.1). 3А). Пара субадульных кошек с вирусными РНК-позитивными фекалиями была эвтаназирована на 11-й день жизни, и вирусная РНК была обнаружена в мягком небе и миндалинах привитого вируса животного, а также в носовой полости, мягком небе, миндалинах и трахее подвергнутого воздействию животного ( Рис.2). 3B), что указывает на то, что в этой паре кошек произошла передача дыхательных капель. Мы усыпляют другой пары животных на день 12 стр. я., и вирусная РНК была обнаружена в миндалинах одного вируса-прививка молодого кота, в носовых раковин, мягкого неба, миндалин, трахеи и других вирусов-прививка молодого кота, но не было обнаружено в любые органы и ткани из двух подвергается молодой кошки (рис. 3B). Антитела против SARS-CoV-2 были обнаружены у всех трех привитых вирусом субадульных кошек и у одной экспонированной кошки с помощью ИФА и метода нейтрализации ( Рис.2). 3, C и D).

Мы повторили исследования репликации и передачи у молодых кошек (в возрасте 70-100 дней) (рис.1). 2, E К H, и 3, E К G, и fig. S6). Гистопатологические исследования, выполненные на образцах от зараженных вирусом молодых кошек, умерших или умертвленных на 3-й день жизни, выявили массивные поражения эпителия слизистой оболочки носа и трахеи, а также легких (рис.1). S7). Эти результаты указывают на то, что SARS-CoV-2 может эффективно размножаться у кошек, причем более молодые кошки более разрешительны и, возможно, что более важно, вирус может передаваться между кошками по воздушно-капельному пути.

Затем мы исследовали репликацию и передачу SARS-CoV-2 у собак. Пять 3-месячных биглей были интраназально привиты 10 ⁵ PFU CTan-H и размещены с двумя неинвазивными биглями в комнате. Орофарингеальные и ректальные мазки от каждого бигля собирали по дням 2, 4, 6, 8, 10, 12, и 14 p. i., для обнаружения вирусной РНК и титрования вируса в клетках Vero E6. Вирусная РНК была обнаружена в пробирках прямой кишки двух привитых собак на 2-е сутки и в пробирке прямой кишки одной собаки на 6-е сутки ( табл. 1). Одна собака, которая была вирусной РНК-позитивной с помощью ее ректального тампона на 2-й день жизни, была усыплена на 4-й день жизни, но вирусная РНК не была обнаружена ни в каких органах или тканях, собранных у этой собаки (рис.1). S8). Инфекционный вирус не был обнаружен ни в одном мазке, собранном с этих собак. Сыворотки были собраны от всех собак на 14-й день жизни для выявления антител с помощью ИФА. Две привитые вирусом собаки были сероконвертированы; две другие привитые вирусом собаки и две контактные собаки были серонегативны для ОРВИ-ков-2 согласно данным ИФА ( Таблица 1 и еще рис. S9). Эти результаты показывают, что собаки имеют низкую восприимчивость к SARS-CoV-2.Таблица 1 предрасположенность собак, свиней, кур и уток к ОРВИ-ков-2 ^а .Посмотреть эту таблицу:

• Посмотреть всплывающее окно
• Посмотреть inline

Мы также исследовали восприимчивость свиней, кур, и уток, чтобы торс-ков-2, используя те же стратегии, которые используются для оценки собак; тем не менее, вирусная РНК не обнаруживается ни тампоны, полученную от этих вирусов привитых животных или из наивного контакта животных (табл. 1), и все животные были серонегативны торс-ков-2, когда тестировали с помощью ИФА с использованием сывороток, собранных на 14-е сутки п.я. (Таблица 1). Эти результаты указывают на то, что свиньи, куры и утки не чувствительны к SARS-CoV-2.

Таким образом, мы обнаружили, что хорьки и кошки очень чувствительны к SARS-CoV-2, собаки имеют низкую восприимчивость, а домашний скот, включая свиней, кур и уток, не чувствительны к вирусу.

Хорьки часто использовались в качестве модели животного для изучения респираторных вирусов человека ( 20-26). В отличие от вирусов гриппа и других ОРВИ человека-коронавирусы, которые размножаются как в верхних, так и в нижних дыхательных путях хорьков ( 20 , 22 – 24 , 26 , 27), мы нашли SARS-CoV-2 только повторяет в носовой turbinate, мягком небе, и миндалинах хорьков. Он также может размножаться в пищеварительном тракте, поскольку вирусная РНК была обнаружена в ректальных мазках инфицированных вирусом хорьков, но вирус не был обнаружен в долях легких, даже после того, как хорьки были интратрахеально привиты вирусом. Остается неясным, вызывает ли вирус более тяжелое заболевание у самцов хорьков, чем у самок хорьков, как это было отмечено среди людей ( 13 , 28 ).

Несколько исследований сообщили, что SARS-CoV-2 использует ангиотензинпревращающий фермент 2 (ACE2) в качестве своего рецептора для входа в клетки ( 3 , 29-31 ). АСЕ2 преимущественно экспрессируется в пневмоцитах II типа и серозных эпителиоцитах трахеобронхиальных подслизистых желез у хорьков ( 25). Хорьки и кошки имеют только два аминокислотных различия в Спайк-контактирующих областях SARS-CoV-2 ACE2 (таблица S1); поэтому основной механизм, препятствующий репликации SARS-CoV-2 в нижних дыхательных путях хорьков, остается изученным. Тот факт, что SARS-CoV-2 эффективно реплицируется в верхних дыхательных путях хорьков, делает их потенциальной моделью животных для оценки противовирусных препаратов или кандидатов вакцин против COVID-19.

Кошки, которых мы использовали в этом исследовании, были беспородными и были восприимчивы к SARS-CoV-2, который эффективно воспроизводился и передавался наивным кошкам. Кошки в Ухане, как сообщается, серопозитивны к SARS-CoV-2 ( 32 ). Эпиднадзор за ОРВИ-ков-2 у кошек следует рассматривать как дополнение к элиминации COVID-19 у человека.

дополнительный материал

science.sciencemag.org/cgi/content/full/science.abb7015/DC1

Материалы и методы

Дополнительный Текст

Финик. От S1 до S10

Таблица S1

Ссылки и примечания ( 33-35)

Контрольный список воспроизводимости MDAR

Просмотр / запрос протокола для настоящего документа от Bio-protocol .

Это статья открытого доступа, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution license , которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии надлежащего цитирования оригинальной работы.

Ссылки и примечания

1. ↵
   1. Л. ЗУ, 
   2. Ф. Руан, 
   3. М. Хуан, 
   4. L. Liang, 
   5. H. Хуан, 
   6. Z. Hong, 
   7. J. Yu, 
   8. М. Кан, 
   9. Y. Песня, 
   10. J. Xia, 
   11. В. Го, 
   12. T. Song, 
   13. J. Он, 
   14. Х.-Л. Йен, 
   15. М. Пейрис, 
   16. J. Wu
   , Вирусная нагрузка SARS-CoV-2 в образцах верхних дыхательных путей инфицированных пациентов . N. Engl. J. Med. 382, 1177–1179 (2020). doi: 10.1056 / NEJMc2001737 pmid: 32074444CrossRefPubMedGoogle Scholar
2. 1. N. Zhu, 
   2. D. Zhang, 
   3. W. Wang, 
   4. X. Li, 
   5. B. Yang, 
   6. J. Song, 
   7. X. Zhao, 
   8. B. Huang, 
   9. W. Shi, 
   10. R. Lu, 
   11. P. Niu, 
   12. F. Zhan, 
   13. X. Ma, 
   14. D. Wang, 
   15. W. Xu, 
   16. G. Wu, 
   17. G. F. Gao, 
   18. W. Tan; China Novel Coronavirus Investigating and Research Team
   , A Novel Coronavirus from Patients with Pneumonia in China, 2019. N. Engl. J. Med. 382, 727–733 (2020). doi:10.1056/NEJMoa2001017pmid:31978945CrossRefPubMedGoogle Scholar
3. ↵
   1. P. Zhou, 
   2. X.-L. Yang, 
   3. X.-G. Wang, 
   4. B. Hu, 
   5. L. Zhang, 
   6. W. Zhang, 
   7. H.-R. Si, 
   8. Y. Zhu, 
   9. B. Li, 
   10. C.-L. Huang, 
   11. H.-D. Chen, 
   12. J. Chen, 
   13. Y. Luo, 
   14. H. Guo, 
   15. R.-D. Jiang, 
   16. M.-Q. Liu, 
   17. Y. Chen, 
   18. X.-R. Shen, 
   19. X. Wang, 
   20. X.-S. Zheng, 
   21. K. Zhao, 
   22. Q.-J. Chen, 
   23. F. Deng, 
   24. L.-L. Liu, 
   25. B. Yan, 
   26. F.-X. Zhan, 
   27. Y.-Y. Wang, 
   28. G.-F. Xiao, 
   29. Z.-L. Shi
   , A pneumonia outbreak associated with a new coronavirus of probable bat origin. Nature 579, 270–273 (2020). doi:10.1038/s41586-020-2012-7pmid:32015507CrossRefPubMedGoogle Scholar
4. 1. F. Wu, 
   2. С. Чжао, 
   3. Б. Ю., 
   4. Y.-M. Chen, 
   5. W. Wang, 
   6. З.-Г. Песня, 
   7. Y. Hu, 
   8. Z.-W. Tao, 
   9. J.-H. Tian, 
   10. Y.-Y. Pei, 
   11. М.-Л. Юань, 
   12. Y.-L. Zhang, 
   13. Ф.-Х. Дай, 
   14. Y. Liu, 
   15. В.-М. Ванг, 
   16. J.-J. Zheng, 
   17. L. Xu, 
   18. В. К. Холмс, 
   19. Y.-Z. Чжан
   , Новый коронавирус связанный с человеческим респираторным заболеванием в Китае . Природа 579, 265-269 (2020). doi: 10.1038 / s41586-020-2008-3 pmid: 32015508CrossRefPubMedGoogle Scholar
5. 1. A. Wu, 
   2. Y. Peng, 
   3. B. Хуан, 
   4. X. Динь, 
   5. X. Ванг, 
   6. P. Niu, 
   7. J. Meng, 
   8. З. Чжу, 
   9. Z. Zhang, 
   10. J. Wang, 
   11. J. Sheng, 
   12. L. Quan, 
   13. Z. Xia, 
   14. W. Tan, 
   15. Г. Ченг, 
   16. T. Цзян
   , Геномный состав и дивергенция нового коронавируса (2019-nCoV), происходящего из Китая . Микроб Хозяина Клетки 27, 325-328 (2020). doi: 10.1016 / j. chom.2020.02.001pmid:32035028CrossRefPubMedGoogle Scholar
6. 1. C. Wang, 
   2. P. W. Horby, 
   3. F. G. Hayden, 
   4. Г. Ф. Гао
   , Новая вспышка коронавируса глобальной проблемы здравоохранения . Ланцет 395, 470-473 (2020). doi:10.1016/S0140-6736(20)30185-9pmid:31986257CrossRefPubMedGoogle Scholar
7. 1. Y. Pan, 
   2. Д. Чжан, 
   3. П. Янг, 
   4. Л. Л. М. Пун, 
   5. В. Ван
   , Вирусная нагрузка SARS-CoV-2 в клинических образцах . Ланцет Заразит. Дис. 20, 411–412 (2020). doi:10.1016/S1473-3099(20)30113-4pmid:32105638CrossRefPubMedGoogle Scholar
8. 1. X. Пан, 
   2. Д. Чен, 
   3. Y. Xia, 
   4. X. Ву, 
   5. T. Li, 
   6. X. Ou, 
   7. Л. Чжоу, 
   8. J. Liu
   , Бессимптомные случаи в семейном кластере с инфекцией SARS-CoV-2 . Ланцет Заразит. Дис. 20, 410–411 (2020). doi:10.1016/S1473-3099(20)30114-6pmid:32087116CrossRefPubMedGoogle Scholar
9. 1. Р. Лу, 
   2. X. Чжао, 
   3. J. Li, 
   4. P. Niu, 
   5. В. Янг, 
   6. H. Wu, 
   7. W. Wang, 
   8. Н . Песня, 
   9. B. Хуан, 
   10. Н . Чжу, 
   11. Y. Bi, 
   12. X. Ма, 
   13. Ф. Жан, 
   14. L. Wang, 
   15. T. Hu, 
   16. Х. Чжоу, 
   17. Z. Hu, 
   18. W. Zhou, 
   19. Л. Чжао, 
   20. J. Chen, 
   21. Y. Meng, 
   22. J. Wang, 
   23. Y. Lin, 
   24. J. Yuan, 
   25. Z. Xie, 
   26. J. Ma, 
   27. W. J. Liu, 
   28. D. Wang, 
   29. W. Xu, 
   30. В. К. Холмс, 
   31. Г. Ф. Гао, 
   32. G. Wu, 
   33. W. Chen, 
   34. W. Shi, 
   35. W. Tan
   , Геномная характеристика и эпидемиология нового коронавируса 2019 года: последствия для происхождения вируса и связывания рецепторов. Ланцет 395, 565-574 (2020). doi:10.1016/S0140-6736(20)30251-8pmid:32007145CrossRefPubMedGoogle Scholar
10. 1. P. Liu, 
    2. X. Z. Тан
    , 2019 новый коронавирус (2019-nCoV) пневмония . Радиология 295, 19 (2020). doi: 10.1148 / radiol.2020200257pmid:32013795CrossRefPubMedGoogle Scholar
11. 1. Q. Li, 
    2. X. Гуань, 
    3. P. Wu, 
    4. X. Ванг, 
    5. Л. Чжоу, 
    6. Y. Tong, 
    7. Р. Рен, 
    8. К. С. М. Люнг, 
    9. Е. Х. Я. Лау, 
    10. J. Y. Wong, 
    11. X. Xing, 
    12. N. Xiang, 
    13. Y. Wu, 
    14. С. Ли, 
    15. В. Чэнь, 
    16. D. Li, 
    17. T. Liu, 
    18. Ж. Чжао, 
    19. М. Лю, 
    20. W. Tu, 
    21. С. Чен, 
    22. L. Jin, 
    23. Р. Янг, 
    24. В. Ван, 
    25. С. Чжоу, 
    26. Р. Ванг, 
    27. Н . Лю, 
    28. Y. Luo, 
    29. Y. Liu, 
    30. Г. Шао, 
    31. H. Li, 
    32. Z. Tao, 
    33. Y. Yang, 
    34. Z. Deng, 
    35. B. Liu, 
    36. Z. Ma, 
    37. Y. Чжан, 
    38. Г. Ши, 
    39. T. T. Y. Lam, 
    40. J. T. Wu, 
    41. Г. Ф. Гао, 
    42. Би Джей Капот, 
    43. В. Янг, 
    44. Г. М. Люнг, 
    45. Z. Feng
    , Ранняя динамика передачи в Ухане, Китай, новой коронавирусной инфекции пневмонии . N. Engl. J. Med. 382, 1199–1207 (2020). doi: 10.1056 / NEJMoa2001316 pmid: 31995857CrossRefPubMedGoogle Scholar
12. 1. С. Хуан, 
    2. Y. Wang, 
    3. X. Ли, 
    4. Л. Рен, 
    5. Ж. Чжао, 
    6. Y. Hu, 
    7. Л. Чжан, 
    8. G. Вентилятор, 
    9. J. Xu, 
    10. X. ГУ, 
    11. Z. Cheng, 
    12. Т. Ю., 
    13. J. Xia, 
    14. Y. Wei, 
    15. W. Wu, 
    16. X. Се, 
    17. В. Инь, 
    18. H. Li, 
    19. М. Лю, 
    20. Y. Xiao, 
    21. H. Gao, 
    22. Л. Го, 
    23. J. Xie, 
    24. G. Wang, 
    25. Р. Цзян, 
    26. Z. Gao, 
    27. Q. Цзинь, 
    28. J. Wang, 
    29. B. Cao
    , Клинические особенности пациентов, инфицированных новым коронавирусом 2019 года в Ухане, Китай . Ланцет 395, 497-506 (2020). doi:10.1016/S0140-6736(20)30183-5pmid:31986264CrossRefPubMedGoogle Scholar
13. ↵
    1. W. J. Guan, 
    2. Z. Y. Ni, 
    3. Y. Hu, 
    4. W. H. Liang, 
    5. C. Q. Ou, 
    6. J. X. Он, 
    7. Л. Лю, 
    8. H. Shan, 
    9. C. L. Lei, 
    10. D. S. C. Hui, 
    11. B. Du, 
    12. L. J. Li, 
    13. G. Zeng, 
    14. K. Y. Yuen, 
    15. Р. К. Чен, 
    16. С. Л. Тан, 
    17. T. Wang, 
    18. P. Y. Chen, 
    19. J. Xiang, 
    20. S. Y. Li, 
    21. J. L. Wang, 
    22. Z. J. Liang, 
    23. Y. X. Peng, 
    24. Л. Вей, 
    25. Y. Liu, 
    26. Y. H. Hu, 
    27. P. Peng, 
    28. J. M. Wang, 
    29. J. Y. Liu, 
    30. Z. Chen, 
    31. G. Li, 
    32. Z. J. Zheng, 
    33. S. Q. Qiu, 
    34. J. Luo, 
    35. C. J. Ye, 
    36. С. Ю. Чжу, 
    37. N. S. Zhong; группа экспертов медицинского лечения Китая для Covid-19
    , Клиническая характеристика коронавирусной болезни 2019 года в Китае . N. Engl. J. Med. (2020). doi: 10.1056 / NEJMoa2002032 pmid: 32109013CrossRefPubMedGoogle Scholar
14. 1. N. Chen, 
    2. М. Чжоу, 
    3. X. Донг, 
    4. J. Qu, 
    5. Ф. Гонг, 
    6. Y. Han, 
    7. Y. Qiu, 
    8. J. Wang, 
    9. Y. Liu, 
    10. Y. Wei, 
    11. J. Xia, 
    12. Т. Ю., 
    13. X. Чжан, 
    14. Л. Чжан
    , Эпидемиологическая и клиническая характеристика 99 случаев новой коронавирусной пневмонии 2019 года в Ухане, Китай: описательное исследование . Ланцет 395, 507-513 (2020). doi:10.1016/S0140-6736(20)30211-7pmid:32007143CrossRefPubMedGoogle Scholar
15. 1. J. F. Chan, 
    2. С. Юань, 
    3. К.-Х. Кок, 
    4. К. К.-В. К, 
    5. H. Chu, 
    6. J. Yang, 
    7. F. Xing, 
    8. J. Liu, 
    9. Си Си- Йи ИП, 
    10. Р. В.-С. Пун, 
    11. Х.-В. Цой, 
    12. С. К.-Ф. Ло, 
    13. К.-Х. Чан, 
    14. В. К.-М. Пун, 
    15. В.-М. Чан, 
    16. J. D. Ip, 
    17. J.-P. Cai, 
    18. V. C.-C. Cheng, 
    19. H. Chen, 
    20. C. K.-M. Hui, 
    21. К.-Ю. Юэнь
    , Семейный кластер пневмонии, связанный с новым коронавирусом 2019 года, указывающим на передачу от человека к человеку: исследование семейного кластера . Ланцет 395, 514 – 523 (2020). doi:10.1016/S0140-6736(20)30154-9pmid:31986261CrossRefPubMedGoogle Scholar
16. ↵
    1. J. F. Chan, 
    2. К.-Х. Кок, 
    3. З. Чжу, 
    4. H. Chu, 
    5. К. К.-В. К, 
    6. С. Юань, 
    7. К.-Ю. Юэнь
    , Геномная характеристика нового патогенного коронавируса человека 2019 года, выделенного от пациента с атипичной пневмонией после посещения Ухань . Эмердж. Микробы Заражают. 9, 221–236 (2020). doi: 10.1080 / 22221751.2020.1719902 pmid: 31987001CrossRefPubMedGoogle Scholar
17. ↵
    1. Исследовательская группа по коронавиридам Международного Комитета по систематике вирусов
    , Вид тяжелый острый респираторный синдром, связанный с коронавирусом: классификация 2019-nCoV и наименование его SARS-CoV-2 . Нэт. Микробиол. 5, 536–544 (2020). doi: 10.1038 / s41564-020-0695-z pmid: 32123347CrossRefPubMedGoogle Scholar
18. ↵
    1. Всемирная организация здравоохранения
    , www.who.int/docs/default-source/coronaviruse/situation-reports/20200311-sitrep-51-covid-19.pdf?sfvrsn=1ba62e57_4 -да .академия Google
19. Supportingвспомогательная информация доступна на сайте Science Online.
20. ↵
    1. Джей Ши, 
    2. G. Deng, 
    3. H. Kong, 
    4. С. ГУ, 
    5. S. Ma, 
    6. X. Инь, 
    7. X. Цзэн, 
    8. P. Cui, 
    9. Y. Chen, 
    10. Х. Янг, 
    11. X. Wan, 
    12. X. Ванг, 
    13. Л. Лю, 
    14. П. Чен, 
    15. Y. Цзян, 
    16. J. Liu, 
    17. Y. Гуань, 
    18. Y. Suzuki, 
    19. М. Ли, 
    20. Z. Qu, 
    21. Л. Гуань, 
    22. J. Zang, 
    23. W. Gu, 
    24. С. Хан, 
    25. Y. Песня, 
    26. Y. Hu, 
    27. Z. Wang, 
    28. Л. ГУ, 
    29. W. Yang, 
    30. L. Liang, 
    31. H. Bao, 
    32. Г. Тянь, 
    33. Y. Li, 
    34. C. Цяо, 
    35. Л. Цзян, 
    36. С. Ли, 
    37. Z. Bu, 
    38. H. Chen
    , Вирулентные мутанты H7N9, обнаруженные у кур в Китае, представляют повышенную угрозу для человека . Ячейка № 27, 1409-1421 ( 2017). doi: 10.1038 / cr.2017.129pmid:29151586CrossRefPubMedGoogle Scholar
21. 1. K. J. Stittelaar, 
    2. L. de Waal, 
    3. G. van Amerongen, 
    4. E. J. Veldhuis Kroeze, 
    5. P. L. Fraaij, 
    6. C. A. van Baalen, 
    7. J. J. van Kampen, 
    8. E. van der Vries, 
    9. А. Д. Остерхаус, 
    10. Р. Л. де Сварт
    , Хорьки как новая животная модель для изучения респираторно-Синцитиальных вирусных инфекций человека в иммунокомпетентных и Иммунокомпрометированных хозяевах . Вирусы 8, 168 ( 2016). doi: 10.3390 / v8060168 pmid: 27314379Аннотация / бесплатный полнотекстовыйGoogle Scholar
22. ↵
    1. Q. Чжан, 
    2. Джей Ши, 
    3. G. Deng, 
    4. J. Guo, 
    5. X. Цзэн, 
    6. X. Он, 
    7. H. Kong, 
    8. С. ГУ, 
    9. X. Ли, 
    10. J. Liu, 
    11. G. Wang, 
    12. Y. Chen, 
    13. Л. Лю, 
    14. L. Liang, 
    15. Y. Li, 
    16. J. Вентилятор, 
    17. J. Wang, 
    18. W. Li, 
    19. Л. Гуань, 
    20. Q. Li, 
    21. Х. Янг, 
    22. П. Чен, 
    23. Л. Цзян, 
    24. Y. Гуань, 
    25. X. Xin, 
    26. Y. Цзян, 
    27. Г. Тянь, 
    28. X. Ванг, 
    29. C. Цяо, 
    30. С. Ли, 
    31. Z. Bu, 
    32. H. Chen
    , Вирусы гриппа H7N9 передаются в хорьках дыхательной каплей . Наука 341, 410 – 414 ( 2013). doi: 10.1126 / science.1240532pmid:23868922CrossRefPubMedWeb of ScienceGoogle Scholar
23. 1. М. Имаи, 
    2. T. Ватанабэ, 
    3. М. Хатта, 
    4. S. C. Das, 
    5. М. Озава, 
    6. К. Шинья, 
    7. Г. Чжун, 
    8. A. Hanson, 
    9. Х. Кацура, 
    10. С. Ватанабэ, 
    11. С. Ли, 
    12. Е. Каваками, 
    13. С. Ямада, 
    14. М. Кисо, 
    15. Y. Suzuki, 
    16. Э. А. Махер, 
    17. Г. Нейман, 
    18. Y. Kawaoka
    , Экспериментальная адаптация вируса гриппа H5 HA придает респираторную капельную передачу реассортантному вирусу H5 HA / H1N1 у хорьков . Природа 486, 420 – 428 ( 2012). doi: 10.1038 / nature10831 pmid: 22722205Аннотация / бесплатный полнотекстовыйGoogle Scholar
24. ↵
    1. S. Herfst, 
    2. E. J. A. Schrauwen, 
    3. М. Линстер, 
    4. С. Чутинимиткул, 
    5. E. de Wit, 
    6. V. J. Munster, 
    7. Э. М. Соррелл, 
    8. Т. М. Бестебрер, 
    9. Д. Ф. Берк, 
    10. D. J. Smith, 
    11. G. F. Rimmelzwaan, 
    12. A. D. M. E. Osterhaus, 
    13. Р. А. М. Фушье
    , Воздушно-капельная передача вируса гриппа A / H5N1 между хорьками . Science 336, 1534 – 1541 ( 2012 ). doi: 10.1126 / science.1213362pmid:22723413CrossRefPubMedGoogle Scholar
25. ↵
    1. J. M. van den Brand, 
    2. Б. Л. Гаагманс, 
    3. Л. Лейтен, 
    4. D. van Riel, 
    5. B. E. E. Martina, 
    6. A. D. M. E. Osterhaus, 
    7. T. Kuiken
    , Патология экспериментальной коронавирусной инфекции SARS у кошек и хорьков . Ветеринар. Патол. 45, 551–562 (2008). doi: 10.1354 / vp.45-4-551pmid:18587105CrossRefPubMedGoogle Scholar
26. ↵
    1. Б. Е. Мартина, 
    2. Б. Л. Гаагманс, 
    3. T. Kuiken, 
    4. Р. А. М. Фушье, 
    5. G. F. Rimmelzwaan, 
    6. G. Van Amerongen, 
    7. J. S. M. Peiris, 
    8. W. Lim, 
    9. A. D. M. E. Osterhaus
    , Вирусология: ОРВИ вирусная инфекция кошек и хорьков . Nature 425, 915 (2003). doi: 10.1038 / 425915a pmid: 14586458CrossRefPubMedGoogle Scholar
27. ↵
    1. Y. K. Chu, 
    2. Г. Д. Али, 
    3. F. Jia, 
    4. Q. Li, 
    5. Д. Кельвин, 
    6. Р. С. Кушетка, 
    7. К. С. Харрод, 
    8. J. A. Hutt, 
    9. С. Камерон, 
    10. S. R. Weiss, 
    11. С. Б. Йонссон
    , Модель торс-ков хорька в исследовании инфекции-вызов . Вирусология 374, 151-163 ( 2008). doi: 10.1016 / j. virol.2007.12.032pmid:18234270CrossRefPubMedGoogle Scholar
28. ↵
    1. Новая Команда Эпидемиологии Экстренного Реагирования На Коронавирусную Пневмонию
    , Эпидемиологическая характеристика вспышки 2019 новых коронавирусных заболеваний (COVID-19) в Китае . [на китайском языке] Zhonghua Liu Xing Bing Xue Za Zhi 41 , 145 – 151 ( 2020 ). doi:10.3760/cma.j. issn.0254-6450. 2020. 02. 003 pmid: 32064853Аннотация / бесплатный полнотекстовыйGoogle Scholar
29. ↵
    1. Р. Ян, 
    2. Y. Чжан, 
    3. Y. Li, 
    4. L. Xia, 
    5. Y. Го, 
    6. В. Чжоу
    , Структурная основа для распознавания SARS-CoV-2 полноразмерным человеческим АСЕ2 . Наука 367, 1444-1448 ( 2020). doi: 10.1126 / science.abb2762pmid:32132184CrossRefPubMedGoogle Scholar
30. 1. М. Летко, 
    2. А. Марци, 
    3. Против Мюнстера
    , Функциональная оценка входа клетки и использование приемного устройства для SARS-CoV-2 и других бетакоронавирусов линии B . Нэт. Микробиол. 5, 562–569 (2020). doi: 10.1038 / s41564-020-0688-y pmid: 32094589CrossRefPubMedGoogle Scholar
31. ↵
    1. Клетка Редакционной Бригады
    , Охватывая ландшафт Терапевтики . Ячейка 181, 1-3 (2020 год ). doi: 10.1016 / j.cell.2020.03.025pmid:32243785Аннотация / бесплатный полнотекстовыйGoogle Scholar
32. ↵
    1. Q. Zhang et al
    ., bioRxiv (2020). . doi: 10.1101 / 2020.04.01.021196Аннотация / бесплатный полнотекстовыйGoogle Scholar
33. ↵
    1. Х. Янг, 
    2. Y. Chen, 
    3. C. Цяо, 
    4. X. Он, 
    5. Х. Чжоу, 
    6. Y. Sun, 
    7. Х. Инь, 
    8. S. Meng, 
    9. Л. Лю, 
    10. Q. Чжан, 
    11. H. Kong, 
    12. С. ГУ, 
    13. С. Ли, 
    14. Z. Bu, 
    15. Y. Kawaoka, 
    16. H. Chen
    , Распространенность, генетика и трансмиссивность у хорьков евразийских птицеподобных вирусов свиного гриппа H1N1. Proc. Натл. Акад. Sci. США 113, 392-397 ( 2016). doi: 10.1073 / pnas.1522643113pmid:26711995CrossRefPubMedGoogle Scholar
34. 1. X. Ли, 
    2. Джей Ши, 
    3. J. Guo, 
    4. G. Deng, 
    5. Q. Чжан, 
    6. J. Wang, 
    7. X. Он, 
    8. К. Ванг, 
    9. J. Chen, 
    10. Y. Li, 
    11. J. Вентилятор, 
    12. H. Kong, 
    13. С. ГУ, 
    14. Y. Гуань, 
    15. Y. Suzuki, 
    16. Y. Kawaoka, 
    17. Л. Лю, 
    18. Y. Цзян, 
    19. Г. Тянь, 
    20. Y. Li, 
    21. Z. Bu, 
    22. H. Chen
    , Генетика, свойство связывания рецепторов и трансмиссивность у млекопитающих естественно выделенных вирусов птичьего гриппа H9N2. ПЛОС Патог. 10, e1004508 (2014). doi: 10.1371 / journal.Амидофосфорибозилтрансфераза.1004508pmid:25411973Аннотация / бесплатный полнотекстовыйGoogle Scholar
35. ↵
    1. D. van Riel, 
    2. V. J. Munster, 
    3. E. de Wit, 
    4. G. F. Rimmelzwaan, 
    5. Р. А. М. Фушье, 
    6. A. D. M. E. Osterhaus, 
    7. T. Kuiken
    , Прикрепление вируса H5N1 к нижним дыхательным путям . Наука 312, 399 ( 2006). doi: 10.1126 / science.1125548pmid:16556800Аннотация / бесплатный полнотекстовыйGoogle Scholar

Благодарности: мы благодарим С. Уотсона за редактирование рукописи. Финансирование: эта работа была поддержана Национальной ключевой программой НИОКР Китая (2020YFC0846500, 2018YFC1200601, 2016YFD0500301). Автор взносам: И. С., З. В., Г. З., Г. Ю., Ч. В., Б. Н., Р. Л., Х. Н., Л. С., З. С., З. Ю., Л. П., Л. Л., П. С., Х. З., Х. З., Ю. Г. проведенные эксперименты; Ж. С., Ж. В., Г. З., Г. Ю., З. С., З. Т., Г. В., Х. С., З. и Б. анализируемых данных; Б. З. и Х. С. предназначен для изучения и написал рукопись. Конкурирующие интересы: ни у одного из авторов нет никаких конкурирующих интересов. Доступность данных и материалов: Все данные доступны в рукописи или дополнительных материалах. Последовательности вирусов, использованных в данном исследовании, были депонированы в GISAID ранее с присоединительными номерами EPI_ISL_402119 и EPI_ISL_408514. Два штамма новых коронавирусов 2019 года (C-Tan и F13) были получены от китайской CDC в соответствии с соглашением о передаче материала, которое позволяет использовать только в объектах P3+ или P4, предотвращает обмен живыми вирусами и предотвращает коммерческое использование. Эта работа лицензируется в соответствии с международной лицензией Creative Commons Attribution 4.0 (CC BY 4.0), которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии, что оригинальная работа правильно цитируется.